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夏季ELISA試劑盒保溫妙招
更新時間:2014-08-05   點擊次數(shù):940次

    ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。ELISA試劑盒這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。

    ELISA試劑盒溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時,產物的生成可達。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予采用。

    保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。

    濕盒應先放在保溫箱中預溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴格限制在規(guī)定的范圍內,ELISA試劑盒標準室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,ELISA板只要平置于操作臺上即可。ELISA試劑盒應注意溫育的溫度和時間應按規(guī)定力求準確。為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。

如何管理ELISA試劑盒的質量控制問題。
1、確定控制的對象;
2、規(guī)定控制對象的標準(預期值);
3、制定或選擇控制方法和手段;
4、測量實際數(shù)據(jù);
5、比較或較對實際數(shù)據(jù)與預期值之間的差異,并說明產生這一差異的原因。超出預定誤差范圍,報警系發(fā)出信號,反饋通道中斷。
6、采取行動,解決差異。恢復原狀(原標準狀態(tài))的手段發(fā)揮作用。
    質量控制是監(jiān)視全過程,排除誤差,防止變化,維持標準化現(xiàn)狀的一個管理過程。這一過程是通過一個反饋環(huán)路進行的,主要采用質控圖進行。
    我公司ELISA試劑盒采用ELISA方法,進行定性定量檢測實驗科研使用,免費代測,自收到標本后,一周內出實驗結果,為您包郵送貨上門。

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