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評(píng)價(jià)ELISA試劑盒的方法
更新時(shí)間:2013-12-18   點(diǎn)擊次數(shù):1295次

    ELISA試劑盒具有許多優(yōu)良特性。盡管有些處理需要*化條件,但只要按要求去做,就十分簡(jiǎn)單明了,并容易掌握。尤其是該方法不需要花費(fèi)大量的時(shí)間作野外觀察,ELISA試劑盒供試所采集的材料可收集起來并存一段時(shí)間,特別適用于一些只取食汁液而不取食獵物硬殼的捕食者胃內(nèi)含物分析,因?yàn)楂C物的堅(jiān)硬部分沒有留在捕食者消化道或排泄物內(nèi)。同時(shí),高靈敏度、特異性、可重復(fù)性以及每次可處理大量材料使得該檢測(cè)法或得了滿意的效果。這是一般的血清學(xué)方法不能比擬的。該方法的一個(gè)缺點(diǎn)是在陰性反應(yīng)中總有一定的顏色產(chǎn)生,必須要有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)來確定陽(yáng)性反應(yīng)的臨界點(diǎn)。

    目前,除繼續(xù)推廣ELISA試劑盒在捕食作用研究中的應(yīng)用及發(fā)展更為有效的方法外,還有兩個(gè)問題需進(jìn)一步研究。一是環(huán)境因子,ELISA試劑盒尤其是溫度對(duì)獵物在捕食者胃內(nèi)殘存時(shí)間的影響,目前的研究還無法考慮不同溫度下消化速率的差異。二是需要對(duì)實(shí)驗(yàn)室或得的數(shù)據(jù)與田間的進(jìn)行比較分析,并對(duì)陽(yáng)性反應(yīng)率進(jìn)行校正。這些問題的研究將有助于定量評(píng)價(jià)捕食作用。

     捕食作用的定量評(píng)價(jià)

   捕食作用的定量評(píng)價(jià)是昆蟲生態(tài)學(xué)家所希望解決的課題之一,但對(duì)生活在自然界的捕食者來說,其捕食作用受到各種環(huán)境因子的影響,它每次的捕食量和捕食后的消化速率是未知的。因此,要對(duì)捕食作用進(jìn)行定量分析就存在很大困難。然而,如果消化的時(shí)間和每次取食的量通過實(shí)驗(yàn)研究確定的話,則對(duì)捕食數(shù)量進(jìn)行估計(jì)是可能的。尤其是ELISA的應(yīng)用,為實(shí)現(xiàn)這種可能提供了保證。SOpp等對(duì)已有的工作進(jìn)行了總結(jié),并提出了一種改進(jìn)的定量評(píng)價(jià)。張文慶等也提出了功能反應(yīng)-血清法來定量評(píng)價(jià)捕食作用。迄今為止,定量評(píng)價(jià)的公式5能較好地?cái)M合實(shí)驗(yàn)結(jié)果。而公式2的擬合效果zui差。但根據(jù)公式要得到準(zhǔn)確的定量評(píng)價(jià)結(jié)果仍是困難的。
 

ELISA試劑盒性能:
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析:
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的8-OHdG標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的8-OHdG含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測(cè)值范圍:0-80nmol/L。
4、敏感度: 0.1 nmol/L。

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