人免疫球蛋白GELISA檢測試劑盒
上海信然生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應科研ELISA試劑盒,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,標準對照品,細胞株，提供免費代測服務，保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量100%保證，若存在質(zhì)量問題，我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細信息，請：：謝
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試驗原理：
IgG試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IgG濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將IgG和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IgG的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人免疫球蛋白GELISA檢測試劑盒
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人免疫球蛋白GELISA檢測試劑盒
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
人免疫球蛋白GELISA檢測試劑盒
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IgG標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IgG含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-80g/L
4、敏感度： 0.1 g/L
NeuN（neuronal nuclei antigen） 神經(jīng)元核抗原抗體 0.2ml
Nrn1/Cpg15/Neuritin 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體 0.2ml
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體 0.1ml
Rabbit anti-Rat IgG/PE 熒光素PE標記兔抗大鼠IgG 0.1ml
Rabbit anti-rat IgM/PE 熒光素PE標記兔抗大鼠IgM 0.1ml
Rabbit anti-guinea pig IgG/PE 熒光素PE標記兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體 0.2ml
NGB（Neuroglobin） 腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體 0.2ml
NeuroD1（neurogenic differentiation factor 1） 神經(jīng)源分化因子抗體 0.2ml
Neurofascin-155 神經(jīng)束蛋白-155 0.2ml
NT（Neurotensin） 神經(jīng)降壓素抗體 0.2ml
NF2/merlin（neurofibromatosis type 2） 2型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.2ml
NFATc1 活化T細胞核因子1蛋白 0.2ml
NFBD1/MDC1（Nuclear factor with BRCT domains protein 1） DNA損傷關(guān)卡蛋白1抗體 0.2ml
NF-H（Neurofilament triplet H） 高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 0.1ml
Mouse anti-goat IgM/APC 熒光素APC標記小鼠抗羊IgM 0.1ml
Mouse anti-human IgG/APC 熒光素APC標記小鼠抗人IgG 0.1ml
Mouse anti-rabbit IgG/APC 熒光素APC標記小鼠抗兔IgG 0.1ml
Mouse anti-rat IgG/APC 熒光素APC標記小鼠抗大鼠IgG 0.1ml
Mouse anti-rat IgM/APC 熒光素APC標記小鼠抗大鼠IgM 0.1ml
NF-H（Neurofilament triplet H） 高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 0.2ml
NFKBp65（p65 NF-kappa B;p65NFKB） 細胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IgG標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IgG含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-80g/L
4、敏感度： 0.1 g/L
NeuN（neuronal nuclei antigen） 神經(jīng)元核抗原抗體 0.2ml
Nrn1/Cpg15/Neuritin 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體 0.2ml
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體 0.1ml
Rabbit anti-Rat IgG/PE 熒光素PE標記兔抗大鼠IgG 0.1ml
Rabbit anti-rat IgM/PE 熒光素PE標記兔抗大鼠IgM 0.1ml
Rabbit anti-guinea pig IgG/PE 熒光素PE標記兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體 0.2ml
NGB（Neuroglobin） 腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體 0.2ml
NeuroD1（neurogenic differentiation factor 1） 神經(jīng)源分化因子抗體 0.2ml
Neurofascin-155 神經(jīng)束蛋白-155 0.2ml
NT（Neurotensin） 神經(jīng)降壓素抗體 0.2ml
NF2/merlin（neurofibromatosis type 2） 2型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.2ml
NFATc1 活化T細胞核因子1蛋白 0.2ml
NFBD1/MDC1（Nuclear factor with BRCT domains protein 1） DNA損傷關(guān)卡蛋白1抗體 0.2ml
NF-H（Neurofilament triplet H） 高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 0.1ml
Mouse anti-goat IgM/APC 熒光素APC標記小鼠抗羊IgM 0.1ml
Mouse anti-human IgG/APC 熒光素APC標記小鼠抗人IgG 0.1ml
Mouse anti-rabbit IgG/APC 熒光素APC標記小鼠抗兔IgG 0.1ml
Mouse anti-rat IgG/APC 熒光素APC標記小鼠抗大鼠IgG 0.1ml
Mouse anti-rat IgM/APC 熒光素APC標記小鼠抗大鼠IgM 0.1ml
NF-H（Neurofilament triplet H） 高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 0.2ml
NFKBp65（p65 NF-kappa B;p65NFKB） 細胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
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